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人脂肪干细胞治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎机制

  人脂肪干细胞治疗实验性自身免疫性葡萄膜炎机制的探讨

  

  目的观察人脂肪干细胞(human Adipose Derived Stem Cells,h ADSCs)对实验性自身免疫性葡萄膜炎(Experimental Autoimmune Uveitis,EAU)的治疗效果,初步探讨其对EAU大鼠T细胞亚群及其细胞因子的影响。

  

  方法1.取抽脂手术腹壁脂肪行人脂肪干细胞贴壁培养,流式细胞术表型鉴定,成脂、成骨诱导实验鉴定。

  

  2.视网膜S抗原与完全弗氏佐剂混合,于第1天,第7天行足垫下注射制备EAU模型。

  

  第12天、13天、14天行ADSCs鼠尾静脉注射,对照组行PBS注射,空白组不予处理,第15天处死大鼠。

  

  3.免疫后观察大鼠眼部临床表现,按Caspi标准评分。

  

  4.处死后取眼球制备HE切片、同时行免疫组化法观察IFN-γ和IL-17表达情况。

  

  5.处死后取脾脏单个核细胞检测各组Th1、Th17、Treg细胞比例。

  

  结果1.成功分离培养h ADSCs,呈贴壁生长,具有相应免疫表型,能成脂、成骨分化。

  

  2.成功制备EAU模型,临床评分显示第9天起病,12天达峰,之后逐渐恢复。

  

  h ADSCs实验组相同时间临床评分明显降低(P<0.05)。

  

  3.第15天,观察大鼠HE组织学切片示:模型对照组视网膜结构破坏明显,排列紊乱,炎症细胞浸润。

  

  h ADSCs实验组评分较对照组明显降低(P<0.05)。

  

  4.IFN-γ、IL-17免疫组化结果:h ADSCs实验组较对照组表达明显降低(P<0.05)。

  

  5.脾脏单个核细胞流式细胞术结果:对照组Th1、Th17、Treg比例较空白组均增高(Th1:15.98±2.39、Th17:12.33±0.622、Treg:2.79±0.14,P<0.05),h ADSCs组调节Th1、Th17细胞比例减少(Th1:4.11±0.34、Th17:4.34±0.39P<0.05),使Treg细胞比例增加(4.79±0.12,P<0.05)。

  

  结论hADSCs可以有效治疗EAU,可能通过抑制Th1、Th17分化,减少其细胞因子IFN-γ、IL-17分泌,促进Treg细胞分化从而减缓疾病的发生发展。

  

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