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细胞增殖、侵袭能力和细胞周期的影响

  CBX8在肝细胞肝癌中的表达及对SMMC-7721细胞增殖、侵袭能力和细胞周期的影响

  

  目的通过检测CBX8 m RNA和蛋白质在肝细胞肝癌组织中的表达及对肝癌细胞系SMMC-7721增殖、侵袭能力和细胞周期的影响,初步探讨CBX8在肝细胞肝癌发生发展中的作用及其意义。

  

  方法釆用实时荧光定量PCR和western blot分别检测15对新鲜肝细胞肝癌手术标本及癌旁组织中CBX8 m RNA和蛋白质的表达;釆用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测CBX8蛋白质在120例肝细胞肝癌手术标本及癌旁组织中的表达情况;分析CBX8的表达与肝癌发生及临床病理特征之间的关系。

  

  分别在肝癌细胞系SMMC-7721中瞬时转染小干扰RNA和过表达质粒,通过MTT、平板克隆形成实验及transwell小室检测CBX8的敲降和过表达对肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及侵袭能力的影响,通过细胞同步化及流式细胞仪检测CBX8对肝癌细胞系SMMC-7721细胞周期的影响。

  

  结果实时荧光定量PCR结果显示CBX8 m RNA在13例(13/15)新鲜肝细胞肝癌手术标本中表达量增高,15例肝细胞肝癌与癌旁组织中的差异具有统计学意义(t=2.742,P<0.05)。

  

  Western blot结果表明CBX8蛋白质在11例(11/15)新鲜肝细胞肝癌组织中表达量增高,15例肝细胞肝癌与癌旁组织中的差异具有统计学意义(t=2.686,P<0.05)。

  

  组织芯片及免疫组化检测结果显示CBX8在100例(83.33%)肝细胞肝癌手术标本中表达,在46例(38.33%)癌旁组织中表达,CBX8在120例肝细胞肝癌及癌旁组织的表达差异具有统计学意义(Z=-8.072,P<0.05)。

  

  CBX8在肝细胞肝癌中的表达水平与患者乙肝表面抗原(HBs Ag)、肿物直径、被膜侵犯以及TNM分期有关(?2=10.900、4.043、46.570、8.374,P<0.05)。

  

  敲降CBX8后,肝癌细胞系SMMC-7721细胞的增殖、克隆形成率和迁移侵袭能力均下降,且与对照组相比差异均具有统计学意义(F=9.395、24.300、71.180、8.745、63.700、9.044,P<0.05);过表达CBX8则结果相反,并且与对照组相比差异均具有统计学意义(F=7.177、36.100、24.680、9.045、7.037、6.525,P<0.05)。

  

  通过检测细胞周期,我们发现敲降CBX8后,实验组G1期细胞所占比例明显增加,S期细胞所占比例减少,差异有统计学意义(t=3.170、3.269,P<0.05);过表达CBX8后,实验组G1期细胞所占比例明显减少,S期细胞所占比例增加,差异有统计学意义(t=2.884、4.443,P<0.05)。

  

  结论CBX8在肝细胞肝癌中呈显著高表达;CBX8在肝细胞肝癌的发生发展中发挥重要作用,能够促进肝癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移、侵袭等生物学行为,并可能通过调控细胞周期G1/S转换进而影响SMMC-7721细胞周期进程;CBX8在肝细胞肝癌发生发展中发挥癌基因作用。


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