|
人胚胎干细胞抗肿瘤作用的体外初步研究人胚胎干细胞抗肿瘤作用的体外初步研究 目的1.研究体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌Hep G2细胞的抑制作用。 2.研究人胚胎干细胞H9与乳腺癌细胞共培养上清液对乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外抑制作用。 方法1.建立人胚胎干细胞(H9)与肝癌HepG2细胞共培养体系,显微镜下观察胚胎干细胞对肿瘤细胞生物学行为的影响,流式细胞仪检测HepG2细胞对肿瘤细胞的凋亡与周期的影响。 2.建立人胚胎干细胞(H9)与乳腺癌MDA-MB-231细胞接触式共培养体系,收集共培养上清液。 以单独培养的H9细胞上清为对照,显微镜下观察共培养上清液对肿瘤细胞生物行为学的影响,用MTT法检测上清液对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Hoechst染色及流式细胞术检测上清液对肿瘤细胞的凋亡影响;Transwell小室法检测上清液对肿瘤细胞侵袭和迁移的影响。 结果1.共培养过程中,肝癌HepG2细胞生长受到抑制,随共培养时间延长,细胞数量逐渐减少,出现老化或凋亡迹象;流式细胞术检测发现HepG2细胞凋亡率显著增加,细胞周期被阻滞于G0/G1期。 2.人胚胎干细胞(H9)与乳腺癌MDA-MB-231共培养上清液处理后的乳腺癌MDA-MB-231细胞形态学发生变化,出现凋亡迹象;Hoechst33258染色后荧光显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态学改变,表现为核缩小、核碎裂等;细胞凋亡率升高,细胞生存率和细胞侵袭、迁移能力均降低,而对照组MDA-MB-231细胞几乎没有受到影响。 结论体外共培养情况下人胚胎干细胞H9对肝癌Hep G2细胞有一定抑制作用;人胚胎干细胞H9与人乳腺癌MDA-MB-231细胞共培养的上清液对MDA-MB-231有一定的体外抑癌效应。 综上所述,人胚胎干细胞一定条件下在体外对肿瘤细胞有某种程度的抑制作用。 |